商品简介 碧云天的Protein A Agarose (Fast Flow)预装柱(Protein A Agarose Prepacked Column, Fast Flow)是一种简便、快速、高效的用于抗体纯化、免疫沉淀(Immunoprecipitation, IP)或免疫共沉淀(Co-IP)的即用型预装柱，也称层析柱(Chromatography column)或纯化柱(Purification column)。本产品也可用于实验中抗原抗体复合物的分离纯化。特别注意：使用本产品对结合的抗体或抗体复合物进行洗脱时，会有微量Protein A脱落，洗脱后的样品不适合用于Western等需要二抗的检测，但适合用于抗原蛋白复合物的质谱分析等不需要使用二抗的检测。
Protein A是一种发现于金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)的细胞壁表面蛋白，分子量为42kDa；Protein G是C型或G型链球菌(Streptococcal bacteria)表达的免疫球蛋白结合蛋白。Protein A和Protein G功能相似，能特异性地与哺乳动物免疫球蛋白(Immunoglobulin, Ig)结合，结合的部位通常为免疫球蛋白的Fc区，但有资料显示Protein A也会和人VH3家族的Fab区结合，而Protein G有时与Fab区也有一定结合。同时，两者对于不同的免疫球蛋白亚类的结合能力有所不同。适当重组改造的Protein A、G与琼脂糖凝胶(agarose)以一定的方式结合，可用于免疫沉淀或抗体的纯化。
使用本品经过一步亲和层析，即可从样品中得到高纯度的抗体，应用广泛。本产品为即用型预装柱，适合于培养液、血清、腹水或杂交瘤细胞培养上清中的IgG的纯化，或含Fc片段的重组蛋白的纯化。Protein A Agarose适合于免疫沉淀human IgG1、IgG2、IgG4，mouse IgG2a、IgG2b及rabbit IgG等。下表是碧云天Protein A、Protein G、Protein A+G Agarose产品与人、小鼠、大鼠常见的免疫球蛋白亚类的结合能力及不同物种的总结合能力情况表。

Species Ig Protein A Protein G A+G Human IgG1 ++++ ++++ ++++ IgG2 ++++ ++++ ++++ IgG3 - ++++ ++++ IgG4 ++++ ++++ ++++ IgA ++ - ++ IgD ++ - ++ IgE ++ - ++ IgM ++ - ++ Mouse IgG1 + ++++ ++++ IgG2a ++++ ++++ ++++ IgG2b +++ +++ +++ IgG3 ++ +++ +++ IgM +/- - +/- Rat IgG1 - + + IgG2a - ++++ ++++ IgG2b - ++ ++ IgG2c + ++ ++ IgM +/- - +/-
Total Ig Protein A Protein G A+G
Human ++++ ++++ ++++
Mouse +++ +++ +++
Rat +/- ++ ++
Rabbit ++++ +++ ++++
Goat - ++ ++
Chicken - + +
Cow ++ ++++ ++++
Guinea Pig ++++ ++ ++++
Hamster + ++ ++
Horse ++ ++++ ++++
Pig +++ +++ +++
Sheep +/- ++ ++
++++: Strong Binding
++~+++: Medium Binding
+: Weak Binding
+/-: Weak or No Binding
-: No Binding
本预装柱中使用的Protein A为重组蛋白，特异性强。本产品中的重组Protein A可与多数哺乳动物IgG的Fc端特异性结合，分子量为34.8kDa。该重组Protein A通过改造，仅保留了与IgG Fc端结合相关的氨基酸序列，去除了结合位点以外可能导致非特异性结合的序列，从而可以有效减少非特异性结合。每个Protein A分子可以结合5个IgG分子。
本预装柱中的琼脂糖物理化学稳定，有相对较高的线性流速。本产品中的Protein A共价连接到4%的高交联度、高流速琼脂糖(cross-linked, 4% Agarose, Fast Flow)上。每毫升Protein A agarose beads (沉淀物)中共偶联有约4mg的重组Protein A。每毫升Protein A agarose beads (沉淀物)可以结合约30-50mg human IgG。本产品中agarose beads的平均直径为90μm，蛋白纯化时的推荐线性流速为50-400cm/h，耐压指数为0.008MPa。
本预装柱可重复次数多。本预装柱再生后，重复使用10次几乎不影响其结合能力。
本预装柱具有标准接口，使用方便。本类型的预装柱为高纯度聚丙烯柱体，低吸附，规格有1ml和5ml两种，鲁尔接口，可适配商品化的各类中压液相纯化系统，如ÄKTA系统(也被称为AKTA系统)等；如果使用注射器或蠕动泵，需要相应的接头进行连接，否则容易出现预装柱内部压力过高而导致推不动甚至漏液的情况，如果没有相应的接头，不推荐连接注射器或蠕动泵使用。
本类型的预装柱有1ml和5ml两种，相应的体积为Protein A Agarose在预装柱中压实后的体积，并保存在20%乙醇溶液中。
包装清单：

产品编号 产品名称 包装
P2025 Protein A Agarose (Fast Flow, 5ml)预装柱 1个
－ 说明书 1份
保存条件：
4℃保存，一年有效。请勿冷冻。
注意事项： 
请勿冷冻保存本产品。
包装中的下堵头请保存好，用于预装柱再生后的密封。
从蛋白样品收集开始，所有步骤中蛋白样品都必须在4℃或冰上操作。
请按照IgG最大结合量的80%以内准备样品，抗体纯化效果更佳。一般血清的总IgG含量在10-15mg/ml。细胞培养上清中的抗体浓度与杂交瘤克隆密切相关，胎牛血清(FBS)中的抗体也同时会被纯化。
本产品仅限于专业人员的科学研究用，不得用于临床诊断或治疗，不得用于食品或药品，不得存放于普通住宅内。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。